1 原理及用途
本试剂盒采用间接竞争ELISA方法检测组织、蜂蜜等样本中的链霉素（Streptomycin，SM），试剂盒由预包被偶联抗原的酶标板、酶标记物、抗体、标准品及其他配套试剂组成。检测时，加入标准品或样品溶液，样本中的链霉素和酶标板上预包被偶联抗原竞争抗链霉素抗体，加入酶标记物后，用TMB底物显色，样本吸光度值与其所含链霉素含量成负相关，与标准曲线比较即可得出样本中链霉素的残留量。
2 技术指标
2.1 试剂盒灵敏度：0.1ppb(ng/ml)
2.2 反应模式：25℃，30min～30min～15min
2.3 检测下限：
组织………………………………4ppb
蜂蜜………………………………2ppb
牛奶、奶粉………………………5ppb
2.4 交叉反应率：
链霉素……………………………
双氢链霉素………………………
卡拉霉素…………………………6.3%
庆大霉素…………………………2.5%
 2.5 样本回收率：
组织、蜂蜜、牛奶………………85±15%
3 试剂盒组成
酶标板……………………………96孔
标准品：各1ml
0ppb、0.1ppb、0.3ppb、0.9ppb、2.7ppb、8.1ppb
高标准品（红盖）：1ppm…………1ml
酶标记物（红盖）…………………11ml
抗体工作液（蓝盖）………………5.5ml
底物液A（白盖）……………………6ml
底物液B（黑盖）……………………6ml
终止液（黄盖）………………………6ml
20X浓缩洗涤液（白盖）……………40ml
5X复溶液（黄盖）…………………50ml
说明书………………………………1份
4 需要的器材和试剂
4.1 仪器：酶标仪、打印机、均质器 、氮气吹干装置、振荡器、离心机、刻度移液管、天平（感量0.01g）
4.2 微量移液器：单道20μl-200μl，100μl-1000μl、多道300μl
4.3 试剂：NaOH、Na2HPO4·12H2O、NaH2PO4·2H2O、正己烷、二氯甲烷、乙腈、磷酸
5 样本前处理
5.1 样本处理前须知：
实验器具必须洁净并使用一次性吸头，以避免污染干扰实验结果。
5.2 配液：
配液1：0.05M  PB缓冲液
    称取12.9g Na2HPO4·12H2O和2.175g NaH2PO4·2H2O加去离子水1000ml溶解。
配液2：0.04M磷酸（蜂蜜样品专用）
    1ml浓磷酸加去离子水定溶至360ml。
配液3：1M NaOH（蜂蜜样品专用）
    称取4g NaOH加去离子水定溶至100ml。
配液4：复溶液
    将5×复溶液用去离子水5倍稀释，用于样本的复溶，复溶液在4℃环境可保存一个月。
5.3 样本前处理步骤：
5.3.1 组织样本
1）称取2±0.05g去除脂肪的匀浆样品，加入8ml 0.05M PB缓冲液，振荡5min，置56℃水浴环境放置30min；
2）室温4000r/min以上离心10min；
3）取1ml上清液加入1ml正己烷，充分混匀，室温4000r/min以上离心5min；
4）去除上层有机相，取50ul下层液，加入450ul 稀释后的复溶液，混合30s；
5）取50ul用于分析。
    样本稀释倍数：40     检测下限：4ppb
5.3.2 蜂蜜、蜂王浆
1）称取2±0.05g 样品，加入4ml 0.04M磷酸，振荡至完全溶解，室温4000r/min以上离心5min，直至清亮。（蜂蜜样品可不用离心直接进行第2步）；
2）加入450ul 1M NaOH将PH值调至7-9之间(蜂王浆样品需将全部上清移至另一干净离心管中调节PH值至7-9之间)，室温4000r/min以上离心5min ，直至清亮；
3）取50ul上清液，加入450ul稀释后的复溶液混匀，混合30s；
4）取50ul用于分析。
    样本稀释倍数：20     检测下限：2ppb
5.3.3 牛奶、奶粉
1）称取2±0.05g样品，加入8ml 0.05M PB缓冲液，振荡5min，置56℃水浴环境放置30min；
2）室温4000r/min以上离心10min；
3）去除上层脂肪，取50ul中层澄清液体，加入450ul 稀释后的复溶液，混合30s；
5）取50ul用于分析。
    样本稀释倍数：50     检测下限：5ppb