1 原理及用途
本试剂盒采用间接竞争ELISA方法检测尿样、组织、饲料等样本中的沙丁胺醇（Salbutamol，SAL），试剂盒由预包被偶联抗原的酶标板、辣根酶标记物、抗体、标准品及其他配套试剂组成。检测时，加入标准品或样品溶液，样本中的沙丁胺醇和酶标板上预包被偶联抗原竞争抗沙丁胺醇抗体，加入酶标记物后，用TMB底物显色，样本吸光度值与其所含沙丁胺醇含量成负相关，与标准曲线比较即可得出样本中沙丁胺醇的残留量。
2 技术指标
2.1 试剂盒灵敏度：0.1ppb(ng/ml)
2.2 反应模式：25℃，30min～15min
2.3 检测下限：
尿液、组织………………………0.1ppb
饲料………………………………1ppb
2.4 交叉反应率：
沙丁胺醇…………………………
盐酸多巴酚丁胺…………………7.2%
西马特罗…………………………0.1%
克伦特罗…………………………3.6%
莱克多巴胺………………………0.1%
肾上腺素…………………………0.1%
异/丙/肾/上/腺/素……………………<1%
2.5 样本回收率：
尿样……………………………………90%±10%
组织……………………………………80%±10%
饲料……………………………………80%±15%
3 试剂盒组成
酶标板……………………………96孔
标准液：各1ml
0ppb、0.1ppb、0.3ppb、0.9ppb、2.7ppb、8.1ppb
高标准液（红盖）：100ppb………1ml
酶标记物（红盖）…………………5.5ml
抗体工作液（蓝盖）………………5.5ml
底物液A（白盖）……………………6ml
底物液B（黑盖）……………………6ml
终止液（黄盖）………………………6ml
20X浓缩洗涤液（白盖）……………40ml
10X复溶液(黄盖)…………………50ml
说明书………………………………1份
4 需要的器材和试剂
4.1 仪器：酶标仪、打印机、均质器 、氮气吹干装置、振荡器、离心机、刻度移液管、天平（感量0.01g）
4.2 微量移液器：单道20μl-200μl，100μl-1000μl、多道300μl
4.3 试剂：氢氧化钠、乙酸乙酯、浓HCl、乙腈、异丙醇、正己烷、无水硫酸钠
5 样本前处理
5.1 样本处理前须知：
实验器具必须洁净并使用一次性吸头，以避免污染干扰实验结果。
5.2 配液：
配液1：1M盐酸溶液
称取8.6ml浓HCl加去离子水至100ml。
配液2：1M NaOH 溶液
称取4g NaOH加去离子水至100ml。
配液3：复溶液
将10×复溶液用去离子水10倍稀释，用于样本的复溶，复溶液在4℃环境可保存一个月。
5.3 样本前处理步骤：
5.3.1 尿样本处理方法
直接取50μl清亮尿样进行测定（浑浊尿样需要过滤或经4000r/min离心5min，以得到清亮尿样），暂不使用的样本应冷冻保存。
尿样本稀释倍数：1    检测下限：0.1ppb
5.3.2 组织样本处理方法一：
称取均质后的组织样本2±0.05g ，加入6ml复溶液，充分振荡2min，室温4000r/min以上离心10min (若组织样本中油脂含量较高，可在振荡后放入85℃水浴10min后再离心)。取50μl上清液进行分析。
样本稀释倍数：4    检测下限：0.4ppb
5.3.3 组织样本处理方法二：
1） 称取均质后的组织样本2±0.05g ，加入1ml复溶液，振荡混匀后加入4ml乙腈，振荡混匀后加入1ml异丙醇，充分振荡5min，室温4000r/min以上离心10min；
2） 取上清液3ml，加入50ul 1M NaOH，加入7ml乙酸乙酯，充分振荡5min，室温4000r/min以上离心10min，取全部上清在56℃条件下氮气或空气流吹至完全干燥；
3） 加入1ml 复溶液溶解干燥的残留物，加入1ml正己烷混合30s ；15℃ 4000转/分 以上离心5min。
4） 取50μl下层液进行分析。
组织样本稀释倍数：1    检测下限：0.1ppb
5.3.4 饲料样本处理方法：
1）称取均质后的饲料样品1.0±0.05g，加入10ml甲醇，再加入5g无水硫酸钠，振荡2min；室温 4000r/min以上离心10min；
2）吸出离心后的上清液1ml，于56℃氮气吹干，用1 ml复溶液溶解干燥的残留物，再加入1mL正己烷混合30s；室温4000r/min以上离心5min。
3）取50μl下层进行分析。
样本稀释倍数：10    检测下限：1ppb